## ELISA 是什么?
ELISA(酶联免疫吸附剂)是一种广泛应用的免疫学技术,用于检测和定量生物样品中的特定抗原或抗体。它基于抗原-抗体特异性结合的原理,并利用酶促反应产生可测量的信号。
## 原理
ELISA 的原理涉及以下主要步骤:
* **固相固定:**将已知的抗原或抗体固定在固体表面上,例如微孔板或免疫管。
* **孵育样本:**含有待测抗原或抗体的样本添加到固相中,并孵育以允许结合。
* **清洗:**清除未结合的样品成分。
* **标记抗体:**一种针对待测抗原或抗体的标记抗体添加到固相中,并孵育以允许结合。标记抗体也被称为探针,并通常用酶标记。
* **显色反应:**添加酶底物,与标记抗体结合的酶将底物转化为有色产物。
* **信号检测:**通过比色法或荧光法检测有色产物,产生与抗原或抗体浓度成正比的信号。
## 类型
根据标记抗体中酶的类型,ELISA 分为以下主要类型:
* **直接 ELISA:**待测抗原或抗体直接用酶标记。
* **间接 ELISA:**待测抗原或抗体用未标记的抗体捕获,然后用酶标记的抗体检测。
* **夹心 ELISA:**待测抗原或抗体被夹在两种不同的抗体之间,其中一种抗体固定在固相上,另一种抗体标记了酶。
## 应用
ELISA 广泛应用于各种医学、生物学和环境领域,包括:
* **抗体检测:**检测血液或其他生物样品中特定抗体的存在和浓度。
* **抗原检测:**检测血液或其他生物样品中特定抗原的存在和浓度。
* **免疫表征:**确定抗体的特异性、亲和力和交叉反应性。
* **诊断:**诊断传染病、自身免疫性疾病和其他疾病。
* **药物开发:**筛选和表征治疗性抗体和疫苗。
* **食品安全:**检测食品中的病原体、过敏原和其他污染物。
* **环境监测:**检测环境中的有害物质和污染物。
## 优点
ELISA 的主要优点包括:
* **灵敏度高:**能够检测非常低浓度的抗原或抗体。
* **特异性强:**能够区分密切相关的抗原或抗体。
* **易于使用:**操作方便,可实现高通量检测。
* **定量:**能够确定抗原或抗体浓度。
* **自动化:**可以使用自动化平台进行大规模检测。
## 局限性
ELISA 的一些局限性包括:
* **交叉反应:**标记抗体可能与其他抗原或抗体交叉反应,导致误差。
* **非特异性结合:**未标记成分可能会与固相或标记抗体非特异性结合,导致背景信号。
* **矩阵效应:**样本中的成分可能会干扰 ELISA 反应,导致错误结果。